降低筛选压力的密码子策略
NNK 与 NDT 简并密码子在饱和突变中的应用
📝 题目 1:
在单点饱和突变中,使用 NNK 简并密码子(N = A/C/G/T,K = G/T)理论上包含多少种密码子?可编码多少种氨基酸?
A. 64 种密码子,编码 20 种氨基酸
B. 32 种密码子,编码全部 20 种氨基酸 + 1 个终止密码子
C. 16 种密码子,编码 15 种氨基酸
D. 32 种密码子,不含终止密码子
📝 题目 2:
相比 NNK,采用 NDT 简并密码子(N = A/C/G/T,D = A/G/T,T = A/C/G)进行饱和突变的核心优势是?
A. 可以编码全部 20 种氨基酸,覆盖度更高
B. 完全消除氨基酸偏好性,每种氨基酸概率相等
C. 库容量更小(约 12 种氨基酸),显著降低筛选工作量,缓解"数字问题"
D. NDT 不需要设计引物,实验操作更简便
💡
数字问题 (Numbers Problem)
:库容量越大,保证 95% 覆盖度所需筛选的克隆数越多。NNK 单点需筛选约 95 个克隆;NDT 仅需约 35 个,大幅降低筛选压力。
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