无需结构信息：当没有 X 射线结构或同源模型时的首选方法。
机制：通过调整 PCR 循环数与 Mg²⁺/Mn²⁺ 浓度，在全基因范围内随机引入点突变。
氨基酸偏好性：碱基转换/颠换概率不均等，导致氨基酸替换存在 bias。
累积冗余：多轮 epPCR 会累积大量对功能无贡献的"旁观者"突变，增加筛选负担，甚至损害稳定性。
适用：盲筛、探索全新功能、无结构数据时的起点。
依赖结构信息：需要 X 射线结构或同源模型来决策随机化位点。
机制：在预定位置（单个或多个残基）引入全部 19 种其它氨基酸，构建聚焦库。
库容量小且聚焦：单点饱和仅 ~20 个变体，多位点组合也远小于 epPCR 全库。
协同效应：同一位点的多点突变可产生非加和性（non-additivity）的协同效果。
典型方案：QuikChange® 协议，使用携带突变信息的互补引物。