epPCR vs ISM:以PAL脂肪酶为例
对比传统易错PCR与迭代饱和突变在立体选择性改造中的效率差异

epPCR · 易错PCR

策略:全基因随机突变,突变位点不可控。

问题:易积累冗余 / 无效突变,多个突变之间协同效应弱。

筛选量:需筛选 >50 000 个转化子。

结果:选择性因子 E 由 4.6 提升至 51

—— 工作量大、进化路径不可预测。

ISM · 迭代饱和突变 / CASTing

策略:聚焦结合口袋位点,逐轮饱和突变并迭代组合。

优势:避免冗余突变,位点间呈现强协同效应

筛选量:仅约 10 000 个转化子(约为 epPCR 的 1/5)。

结果:选择性因子 E 飙升至 594

—— 半理性、可追溯、可重现的进化路径。

课件编辑
文字字体