随机突变路径 — epPCR 适合无结构信息时的全基因随机突变；饱和突变聚焦特定位点；ISM 通过迭代方式系统探索序列空间，CAST 针对活性位点、B-FIT 针对热稳定性。
重组路径 — DNA shuffling 要求 ≥70% 同源性；Family shuffling 利用同源家族基因；ADO 通过人工合成寡核苷酸突破同源性限制。
计算辅助 — SCHEMA 用接触矩阵最小化重组破坏；ProSAR 统计序列-活性关系；HotSpotWizard 整合多维信息识别改造热点。
策略核心 — 保留 lateral hits 避免局部最优；NNK/NDT 密码子策略降低筛选压力；文库质控防止"寻找不存在的东西"。