突破同源性限制:合成洗牌 ADO
Assembly of Designed Oligonucleotides · 无需序列同源即可重组
ADO 合成洗牌流程 展示 ADO 通过设计含简并碱基的重叠寡核苷酸,将两条亲本基因组装为嵌合基因库,无需同源性且消除亲本自杂交。 ADO 合成洗牌三步流程 人工设计寡核苷酸 · 摆脱天然同源约束 ① 亲本基因对齐 Gene A Gene B 彩色点 = 不同氨基酸信息 ② 设计重叠寡核苷酸 ★ 含简并碱基 片段间保留重叠区 ③ 聚合酶组装 嵌合基因库 ADO 的两大核心优势 1 无需同源性 亲本序列相似度低也能重组 2 消除亲本自杂交 人工设计避免模板自退火干扰 关键设计要点: · 灰色保守区段可作为同源重组的连接区(Case I) · 无同源侧翼时可通过单链连接酶组装(Case II) → 突破 DNA shuffling 必须 ≥70% 同源性的限制
ADO 本质 — 用人工合成的寡核苷酸替代 DNase 随机片段,把"重组"从依赖天然同源变成可编程设计。
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